检测血清中冷自身抗体过程刍议

发表时间:2018-06-09 ? 来源:《系统医学》2017年6期 ? 作者:张子夏
[导读]:通过对三例实验结果进行分析发现,伴随温度的升高,冷抗体的凝集能力会随之下降。

(泉州市惠安县医院 ?福建 ?惠安 362100)

摘要:目的:探讨检验血清中自身冷抗体对临床输血安全的影响;方法:三例贫血待查患者中 发现因冷自身抗体所致的冷凝集素综合征;结果:患者血清中含有较强的冷自身抗体 但不排除同种抗体;结论:通过对三例实验结果进行分析发现,伴随温度的升高,冷抗体的凝集能力会随之下降。
关键词:冷自身抗体 ?检验 ?
被冷自身抗体引发的溶血性贫血一般称之为冷凝集素综合征,分为两种,即原发性和继发性。原发性常连锁感染于支原体肺炎,传染性单核细胞增多症及淋巴系统肿瘤。导致冷自身抗体在血循环中直接破坏红细胞,多为获得性。常常出现急性发作状况,如不及时诊治会出现生命危险。冷抗体多数为IgM型。冷抗体引发的自身免疫性疾病常继发于肝硬化、淋巴瘤、传染性单核细胞增多症、支原体肺炎、多发性骨髓瘤等疾病。此外,异常升高的血清冷抗体效价可能使血型鉴定及交叉配血困难。????
2017-03-22 通过对三例贫血患者中,发现因为冷自身抗体所导致的冷凝集素综合征, 现作如次分析:
1 血型血清学检查
1.1 ABO 血型系统鉴定
见表 1
?????????????????表1 ?3例患者ABO血型鉴定 ?????????????
????正定型 ????????反定型 ???????????????????
? 抗A 抗B AC BC OC 自身细胞
患者李某 0 2+ 2+ 1+ 1+ 1+
患者林某 2+ 0 1+ 2+ 1+ 1+
患者张某 0 2+ 2+ 1+ 1+ 1+
正反定型不符
1.2 将三例患者红细胞经摄氏45度温盐水洗涤后确定李某为 B型,林某为 A 型,张某为 B 型。
1.3 通过三例患者不规则抗体筛选
将三例患者血清与 10 例 O 型献血者及自身 RBC 进行抗体检验,摄氏4度,室温摄氏22度,温盐水摄氏37度介质中,通过菠萝酶试验,就能发现间接抗人球蛋白试验均为阳性。而与三份 O 型脐血红细胞不凝集,考虑为抗 I,自身抗体检查及效价测定。
见表 2
表2 ?盐水介质中自身抗体及效价测定
温度(C) 自身细胞 成人O型红细胞
4 1:256~1:64 1:256~1:64
22 1:64~1:32 1:64~1:32
37 1:16~1:8 1:16~1:8
通过检验结果看,患者血清中含有较强的冷自身抗体,但不排除同种抗体。
1.4 直接抗人球蛋白试验 DAT 1+ 多价抗人球蛋白2+ 抗 IgG 阴性 抗 C 3 2+(以上试剂均由上海市血液中心提供)。
1.5 吸收放散试验。将三例患者 RBC 用 37 温盐水洗三次,进行 56 热放散,至直抗阴性。在这种情况下,采取将上述直抗阴性细胞用酶处理离心的措施,取压积细胞一份吸收24h 吸收后的血清与 37 温盐水洗过的自身细胞无凝集,则说明这血清吸收完全,再将吸收掉的自身抗体血清与 10 例 O 型献血者实施筛选,全部呈现阴性。证明这三例患者都含有冷自身抗体,不存在同种抗体。
2 讨论
高效价冷自身抗体不仅给ABO血型和Rh系统定型、抗体鉴定及交叉配血带来困难,同时还掩盖了具有临床意义的同种异型抗体的存在。冷抗体是一种自身抗体,一般人群血清中冷抗体效价≤1∶16,对血型鉴定结果没有影响,但在某些病理情况下,高效价冷抗体在37℃仍然具有较强凝聚力可能会引发血型定型不准确或者交叉配型困难从而影响输血安全。通过对三例实验结果进行分析发现,伴随温度的升高,冷抗体的凝集能力会随之下降。对于低效价冷抗体,当温度达到37℃时,其凝集活性几乎完全消失,不会对血型定型造成影响;与低效价冷抗体不同,高效价冷抗体的凝集力在温度达到37℃时仍处于较强状态,容易引发血型定型不准确或者交叉配型困难。?
上面病例为冷集素病(CHD) 又把它称冷凝集素综合征,是伴有冷抗体的自身免疫性溶血性贫血疾病。按其性质可以划分成急性和慢性两种情况,就急性的来言,它常属多克隆冷凝集素,一般是常见支原体感染后,待到患传染性单核细胞增多症时见得多。慢性一般是与具有冷凝集活性的 IgM 副蛋白(单克隆)相关联。冷反应性自身抗体的自身免疫性溶血性贫血的溶血原因是当外周循环的温度低于32℃时IgM冷自身凝集素和患者的红细胞发生反应。IgM抗体及其抗原的反应使补体致敏红细胞,特别是C3和C4成分,当红细胞回到积蓄循环较温暖的中央部分时,IgM冷抗体从细胞表面释放出来,将补体致敏在红细胞上,这样溶血很快发生。那么抗 IgG(-) C 3 (+) 自身抗体的存在可以掩盖同种抗体,妨碍同种抗体的检出,使输血前检查和交叉配血试验复杂化。难以找到相配合的细胞,因此首先要排除自身抗体,要以递增温度(由 37 逐升到 45 不要太高,以防溶血)的生理盐水反复洗涤红细胞。患者血清经自身细胞吸收后,不凝集同型 O 型及自身细胞,再检验是否存在同种抗体。
需进一步鉴定,若自身对照凝集,证明患者血清中含有冷自身抗体,将正反定型和自身对照试管全部放入37℃水浴箱孵育3~5 min后立即离心判定,凝集消失,说明此患者血清中含有低效价冷自身抗体,正反定型和交叉配型均在37℃水浴箱中进行。若凝集减弱但不消失,需进行吸收和放散实验,用放散后的细胞和吸收后的血清进行交叉配血试验。在对冷抗体效价较高或者自身抗体中含有抗I的病例进行输血时对患者自身要注意保暖。
参考文献
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